多指標(biāo)高通量數(shù)字ELISA芯片的臨床應(yīng)用:芯棄疾多指標(biāo)數(shù)字ELISA芯片采用空間編碼技術(shù),單個芯片集成8個**檢測通道,每個通道可同時檢測2-8個靶標(biāo),支持多重蛋白標(biāo)志物的并行分析。例如,在***性疾病診斷中,IL-6(靈敏度1pg/mL)與PCT(靈敏度10pg/mL)的雙重檢測可在15分鐘內(nèi)完成,覆蓋膿毒癥風(fēng)險分層與細(xì)菌/病毒***鑒別。芯片內(nèi)置微流控網(wǎng)絡(luò),通過毛細(xì)力驅(qū)動實現(xiàn)樣本自動分配與試劑混合,無需外部泵閥,檢測通量達(dá)336測試/小時(8樣本×8指標(biāo))。在急診科應(yīng)用中,該芯片與便攜式熒光掃描儀(尺寸20×15cm)配合,可在床旁快速評估炎癥風(fēng)暴(如IL-6>100pg/mL提示重癥風(fēng)險),輔助臨床決策時間從4小時縮短至20分鐘,效率提升80%。此外,芯片支持定制化指標(biāo)組合,例如在腫瘤免疫***監(jiān)測中,可同時檢測PD-L1、IFN-γ及IL-2R,動態(tài)評估T細(xì)胞活性與藥物響應(yīng),為個性化***方案優(yōu)化提供數(shù)據(jù)支持。單分子 POCT 芯片檢測 IL-6 自動版低至 0.5pg/ml,手動版 1pg/ml,線性趨勢良好。亞皮克級數(shù)字ELISA高靈敏
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測我們的方法利用了亞飛克爾反應(yīng)室陣列(圖1C)我們稱之為單分子陣列(SiMoA)——可以分離和檢測單個酶分子20-24。這種方法借鑒了Walt等人20-23的工作陣列用于研究單個酶的動力學(xué)和抑制作用。我們的目標(biāo)是利用捕獲和檢測單個酶的能力來檢測用酶標(biāo)記的單個蛋白質(zhì)分子。在這個單分子免疫測定的第一步(圖1A),在微球(直徑μm)上形成一個三明治抗體復(fù)合物,結(jié)合的復(fù)合物用酶標(biāo)記,如同常規(guī)的基于微球的ELISA。當(dāng)測定含有極低濃度蛋白質(zhì)的樣品,蛋白質(zhì)的比值分子(以及由此產(chǎn)生的酶標(biāo)記復(fù)合物)與微球的比例很?。ㄍǔP∮?:1),因此含有標(biāo)記免疫復(fù)合物的微球百分比遵循泊松分布,導(dǎo)致單個微球上存在單一免疫復(fù)合物。例如,如果在(3000個分子)的蛋白質(zhì)中捕獲并標(biāo)記了50μM的蛋白質(zhì),并且在200,000個微球上進行標(biāo)記,則珠子,然后,。無法檢測到這些低數(shù)量的酶使用標(biāo)準(zhǔn)檢測技術(shù)(例如,平板閱讀器)的標(biāo)簽,因為熒光染料由每種酶生成的產(chǎn)物擴散到一個大卵試驗體積(通常為),并進入其中需要數(shù)十萬種酶標(biāo)簽才能產(chǎn)生高于該水平的熒光信號背景。 單分子免疫檢測數(shù)字ELISA試劑開放芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,10ul樣本可同時測2-4個指標(biāo)!
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA 具有超敏的優(yōu)點:
檢測方法為陣列成像。陣列成像涉及對陣列中的每個孔進行檢測以確定是否存在微球并判斷微球是否具有酶活性。為此,開發(fā)了一種圖像分析軟件,該軟件首先創(chuàng)建一個陣列的“掩?!?,以定義孔定位和邊界進行檢測。然后將孔掩模應(yīng)用于陣列的熒光圖像,以確定孔內(nèi)微球和酶的存在。對于陣列的熒光圖像,當(dāng)進行多重檢測時,會生成微球群體或微球亞群的熒光強度直方圖。直方圖中的峰值自動識別并用于確定微球群體。
芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個生物實驗室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個酶產(chǎn)生的熒光團限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁將每個微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);補充圖1顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個免疫復(fù)合物同時檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)(圖1D)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,微量檢測,使用微量樣本就能測試;
創(chuàng)新性的解決方案:芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA
我公司推出的數(shù)字化高靈敏ELISA芯片檢測產(chǎn)品應(yīng)用場景:適合生物實驗室、醫(yī)學(xué)實驗室、科研市場、產(chǎn)品預(yù)研、產(chǎn)品開發(fā)、ELISA檢測、動物病情檢測等各種應(yīng)用場景應(yīng)用范圍:各種高靈敏多重免疫檢測,可替代各種ELISA試劑盒,及其他免疫檢測產(chǎn)品。
我們繼續(xù)在兩個關(guān)鍵領(lǐng)域改進SiMoA技術(shù)。首先,在兩個關(guān)鍵領(lǐng)域可能再增加兩個靈敏度等級基于對酶標(biāo)記的敏感性(圖2)可以檢測蛋白質(zhì),如果非特異性相互作用可以更小化背景信號。單個珠子上分離和詢問單個分子的能力為區(qū)分抗體-抗原結(jié)合事件和非特異性結(jié)合復(fù)合物。其次,我們簡化了檢測的物流。然而,即使在目前的形式下,我們相信數(shù)字ELISA有可能促進疾病的早期診斷和治理。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,多重檢測,同時測試2-6個檢測項目;芯棄疾-勃望初芯數(shù)字ELISA檢測
新型的單分子檢測方法的普及版;亞皮克級數(shù)字ELISA高靈敏
抗體篩選芯片:高效正交配對的關(guān)鍵工具,抗體篩選芯片在單通道內(nèi)以3×6、4×5等排列方式預(yù)設(shè)18-21個抗體檢測區(qū)域,支持288-336次測試/小時的高通量篩選,成為抗體開發(fā)領(lǐng)域的高效平臺。其**優(yōu)勢在于“多、快、省”:單通道多指標(biāo)檢測能力滿足多種抗體配對同時測試,5μl微量吸樣適配珍稀臨床樣本,同一份樣本可測試不同抗體配對,***降低實驗成本。在IL-6抗體篩選案例中,8個捕獲抗體與8個標(biāo)記抗體的49種配對*需1小時即可完成初步篩選,快速鎖定特異性與靈敏度合格的組合。該芯片適用于疾病初篩中標(biāo)記物的正交配對篩選,尤其適合**困難場景下的交叉反應(yīng)測試,如眼內(nèi)房水病原體檢測,為抗體工程與精細(xì)醫(yī)療提供了高效的篩選工具,加速高親和力抗體的開發(fā)進程。亞皮克級數(shù)字ELISA高靈敏