堿燒傷致角膜損傷大鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱:堿燒傷致角膜損傷大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:160-200g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2020堿燒傷致角膜損傷大鼠模型1周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法:氫氧化鈉致大鼠角膜化學(xué)性損傷。大鼠用戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,用干棉棒拭去結(jié)膜囊多余液體,將統(tǒng)一規(guī)格直徑3mm的圓形濾紙片浸入1mol/LNaOH溶液中20s,飽和后取出置于干燥濾紙上1秒以吸去過(guò)多的堿液,將濾紙片貼敷于大鼠右眼角膜90s后移去,立即用滅菌水沖洗結(jié)膜囊及角膜2min。...
微波爐中融化后制成1%的瓊脂糖膠。取10μlpcr產(chǎn)物于加樣孔中,120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統(tǒng)成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結(jié)果,wt表示野生型對(duì)照,條帶大小為223bp;het表示雜合子,有兩個(gè)條帶223bp和358bp;sixko表示純合子,條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3-cre鑒定結(jié)果。six3-cre大小為200bp。根據(jù)圖4中a的結(jié)果,顯示所采用的鑒定方法可對(duì)新生小鼠的基因型進(jìn)行有效鑒定。其中,gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr...
一種是用beta巰基乙醇打開(kāi)蛋白質(zhì)分子二硫鍵的,另一種是用DTT(二硫蘇糖醇)。兩者的作用是一樣的,但特點(diǎn)不一樣,前者更容易與氧氣反應(yīng),穩(wěn)定性比后者差,如果在常溫下暴露在空中,前者只能維持24小時(shí)的活性,后者卻可以維持7天左右。所以該如何選擇?如果是蛋白樣品較少,跑幾次就可以用完的樣品,這時(shí)選擇beta巰基乙醇。如果樣品很多,計(jì)劃跑上幾十次的,優(yōu)先選擇DTT,建議變性后分裝保存。二、SDS-PAGE凝膠配制1、配膠前準(zhǔn)備首先強(qiáng)調(diào)一下,一塊好的膠是跑好蛋白的前提,所以這個(gè)環(huán)節(jié)也不容忽視。玻璃板的選擇,一種是1毫米厚度的,另一種是,這個(gè)厚度選擇也是有講究的,如果上樣體積小于10微升,優(yōu)先選...
然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準(zhǔn)確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應(yīng)取有細(xì)支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實(shí)驗(yàn)需進(jìn)行多組織樣本的采集,采集順序應(yīng)按照:消化,神經(jīng)系統(tǒng),皮膚,肌肉等的順序進(jìn)行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長(zhǎng)管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應(yīng)盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來(lái)一些不必要的問(wèn)題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動(dòng)物取下的小塊組織,立即置入液態(tài)固定劑(這是應(yīng)用經(jīng)常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過(guò)大...
建立疾病模型的目的是為了防治人類疾病。因此,疾病模型研究結(jié)果的可靠程度取決于模型與人類疾病的相似或可比擬的程度。接下來(lái)就讓上海研錄帶您了解相關(guān)知識(shí)。一個(gè)好的疾病模型應(yīng)具有以下特點(diǎn):①能夠再現(xiàn)所要研究的人類疾病,動(dòng)物疾病表現(xiàn)應(yīng)該與人類疾病相似;②動(dòng)物能重復(fù)產(chǎn)生該疾病,盡可能能在兩種動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制該??;③動(dòng)物背景資料完整,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格,生命周期要滿足實(shí)驗(yàn)需要;④動(dòng)物要價(jià)廉、來(lái)源充足、便于運(yùn)送;⑤盡可能選用小動(dòng)物。生物醫(yī)學(xué)科研專業(yè)設(shè)計(jì)中常要考慮如何建立動(dòng)物模型的問(wèn)題,因?yàn)楹芏嚓U明疾病及療效機(jī)制的實(shí)驗(yàn)不可能或不應(yīng)該在患者身上進(jìn)行。常要依賴于復(fù)制動(dòng)物模型,但一定要進(jìn)行周密設(shè)計(jì),設(shè)計(jì)時(shí)要遵循下列一些...
SD大鼠腦缺血致腦梗死模型【材料】水合氯醛、線栓直徑(體重250-300g)【方法】1、10%水合氯醛(35mg/kg)腹腔注射麻醉。2、仰臥位固定,頸正中線切口,分離肌肉和筋膜,分離左側(cè)頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)。3、微動(dòng)脈夾暫時(shí)夾閉頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),活扣結(jié)扎近心端頸總動(dòng)脈(CCA)、頸外動(dòng)脈(ECA)打雙結(jié),在雙結(jié)中間剪開(kāi)小口插入線栓。4、將拴線插入到頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA),用眼科鑷輕推拴線,以頸外動(dòng)脈(ECA)和頸內(nèi)動(dòng)脈(ICA)分叉處為參考位置。5、栓線插入預(yù)刻深度,感到有阻力,說(shuō)明栓線已到達(dá)腦中動(dòng)脈(MCA),打結(jié)固定栓線。6、血管外的栓線不要留...
實(shí)驗(yàn)樣本分類實(shí)驗(yàn)一般采取樣本有:血液樣本、組織樣本和細(xì)胞樣本。通常,組織樣本采集后,應(yīng)立即用等滲溶液(PBS或生理鹽水)盡量把血液漂洗干凈(除非血液也是分析對(duì)象),用濾紙或紗布吸干,把樣本分切成幾分,每份的體積約2個(gè)黃豆大小,每份用一個(gè)管子裝。血液樣本的采集應(yīng)根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)的要求,將會(huì)采取不同策略。血清樣本:全血中不加抗凝劑,血液凝固后取出的不含凝血因子的淡黃色透明液體。(全血標(biāo)本室溫放置2小時(shí)3000rpm/min離心15min)血漿樣本:全血中加抗凝劑,血液凝固后取出的含凝血因子的淡黃色透明液體。(可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃,3000rpm/min離...
導(dǎo)師給我們上的堂課往往就是交代我們要詳細(xì)記好實(shí)驗(yàn)記錄,只要是和實(shí)驗(yàn)相關(guān)的,無(wú)論是照片,還是文字,必須要及時(shí)事無(wú)巨細(xì)地詳細(xì)記錄。并且要備份好每一份實(shí)驗(yàn)記錄。我個(gè)人一般喜歡每天及時(shí)地記在「科研實(shí)驗(yàn)記錄本」上面,然后拍照掃描成電子版儲(chǔ)存在電腦和云端。時(shí)間規(guī)劃首先,個(gè)人是不贊同每天24小時(shí)泡在實(shí)驗(yàn)室的,高效率是關(guān)鍵。建議提前一天規(guī)劃好第二天需要做的事情,按照代辦事項(xiàng)的格式逐條列出,哪一個(gè)時(shí)間段需要做什么事情?這樣的好處有兩點(diǎn),一個(gè)是自己提前把時(shí)間預(yù)約好,可以留出足夠的時(shí)間休息和娛樂(lè);另一個(gè)是在執(zhí)行計(jì)劃的時(shí)候往往會(huì)有一種時(shí)間緊迫感,辦事起來(lái)往往更高效且不會(huì)遺漏。總之,預(yù)實(shí)驗(yàn)就是迷你版正式實(shí)驗(yàn),希...
角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱:角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2021角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型5周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法:角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴**2滴消毒,以保持結(jié)膜清潔。開(kāi)瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切,并滴入2滴氯霉素眼**潤(rùn)洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟...
首先,預(yù)實(shí)驗(yàn)必須要當(dāng)做正式實(shí)驗(yàn)來(lái)對(duì)待(態(tài)度要放端正,這是必須的)。預(yù)實(shí)驗(yàn)的每一步都需要詳細(xì)規(guī)劃,多方籌謀。不論是實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇,還是檢測(cè)試劑的購(gòu)買,都盡量和正式實(shí)驗(yàn)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。建議大家先把所有試劑和藥物購(gòu)買完畢后,再去購(gòu)買實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。因?yàn)閯?dòng)物會(huì)長(zhǎng)胖,長(zhǎng)胖后給藥劑量就要增加,不僅多花錢,并且還容易影響實(shí)驗(yàn)效果。筆者曾經(jīng)提前將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物買回,但因?yàn)樘厥庠驔](méi)能購(gòu)買到造模藥物,終只能忍痛割愛(ài)將動(dòng)物贈(zèng)送他人,白白虧了一筆血汗錢(那批老鼠在我這兒白吃白喝長(zhǎng)得太胖,沒(méi)辦法用作造模)。動(dòng)物及試劑購(gòu)買首先需要考慮:實(shí)驗(yàn)動(dòng)物品種、體重、性別、周齡(通常根據(jù)既往文獻(xiàn)報(bào)道可以獲得答案)、數(shù)量(需要考慮到實(shí)驗(yàn)有一定...
gaaaccctatgaatgtaaccaatgtgg660taaagcctttgcatattccaacagtctccaaatacatcaaagaacacacactggagagaa720accctatgaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgcatatcacaatagtctccaaataca780taaaagtacacacactggagagaaaccctataaatgtaaccagtgtggtaaagcctttgc840atatcacattactctccgaacacataaaggaacacacactgaagagaaaccctatgaatg900taaccaatgtggta
可在設(shè)定的壓差標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)無(wú)極調(diào)控,以保障系統(tǒng)對(duì)海拔(3000m~7000m)的微負(fù)壓進(jìn)行模擬。并且,進(jìn)排風(fēng)風(fēng)管裝有高效空氣過(guò)濾器,使進(jìn)入飼養(yǎng)倉(cāng)2的氣體潔凈。實(shí)施例3在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原低氧環(huán)境模擬裝置包括惰性氣源,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13連接,所述惰性氣源與進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13之間設(shè)置有比例式氣閥,還包括設(shè)置在飼養(yǎng)倉(cāng)2內(nèi)的嵌入式氧測(cè)定儀。本實(shí)施例的工作原理:惰性氣源可以是惰性氣體儲(chǔ)備罐或者是液態(tài)惰性氣體儲(chǔ)備罐。在模擬低氧環(huán)境時(shí),外接惰性氣體儲(chǔ)備罐連接進(jìn)風(fēng)系統(tǒng)13。比例式氣閥和嵌入式氧測(cè)定儀均與功能控制面板19連接,通過(guò)功能控制面板19上的氧濃度...
IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型,并觀察模型的生化及病理指標(biāo)特點(diǎn)?!静牧稀?、酸化水:鹽酸調(diào)滅菌水;2、蓖麻油+CCl4:5:1配制;3、LPS:;4、血清白蛋白BSA:800mg/kg用量,滅菌水配制;【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導(dǎo)法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次,配制160mg/ml,灌胃100ul/只,持續(xù)8周;2、同時(shí)皮下注射蓖麻油和CCl4(5:1),1次/周,持續(xù)8周;3、分別于第6、8周以()尾靜脈注射LPS,1次/周;4、每?jī)芍苋?4h尿液一次觀察尿蛋白及紅細(xì)胞;5、每日觀察精神、飲食、大小便,第9周處死...
中風(fēng)模型)股動(dòng)脈內(nèi)皮損傷模型頸動(dòng)脈結(jié)扎或部分結(jié)扎術(shù)深靜脈血栓模型下肢缺血模型門腔靜脈分流術(shù)左、右心血流動(dòng)力學(xué)測(cè)試左心系統(tǒng)測(cè)壓右心系統(tǒng)測(cè)壓腹部手術(shù)膽管結(jié)扎術(shù)胃大部切除術(shù)小腸部分切除術(shù)急性腎衰模型單側(cè)腎切除術(shù)3/4腎切除術(shù)5/6腎切除術(shù)脾切除術(shù)腎上腺切除術(shù)腎上腺髓質(zhì)摘除術(shù)骨關(guān)節(jié)炎模型脾神經(jīng)切除術(shù)肝臟迷走神經(jīng)切斷術(shù)胃迷走神經(jīng)切斷術(shù)膈下迷走神經(jīng)切斷術(shù)去勢(shì)術(shù)輸精管結(jié)扎術(shù)卵巢切除術(shù)單側(cè)或雙側(cè)輸卵管結(jié)扎術(shù)子宮切除術(shù)輸尿管結(jié)扎術(shù)神經(jīng)系統(tǒng)手術(shù)單側(cè)腦內(nèi)定位插管雙側(cè)腦內(nèi)定位插管側(cè)腦室導(dǎo)管側(cè)腦室微量滲透泵導(dǎo)管第3腦室插管腓腸肌神經(jīng)切除術(shù)軟組織手術(shù)甲狀腺切除術(shù)甲狀旁腺切除術(shù)甲狀腺切除術(shù)伴甲狀旁腺再植入術(shù)胸腺切除...
然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過(guò)夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應(yīng)的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結(jié)果見(jiàn)圖8,在小鼠4月齡時(shí),通過(guò)視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn),相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短,表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發(fā)明實(shí)施例以小鼠為例,通過(guò)cre-loxp基因敲除技術(shù),在小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現(xiàn)出了視力受損,視細(xì)胞外節(jié)變短退化以及視細(xì)胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征...
應(yīng)根據(jù)所檢測(cè)指標(biāo)的要求,需采取不同策略處理。在如今分子生物學(xué)當(dāng)?shù)赖默F(xiàn)實(shí)背景下,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)除了對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體征及生理指標(biāo)進(jìn)行的監(jiān)控外,各種分子檢測(cè)甚至是組學(xué)檢測(cè)也開(kāi)始大行其道,動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)束之后的機(jī)制研究成為了實(shí)驗(yàn)的重頭戲。一般來(lái)說(shuō),動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測(cè)對(duì)象主要包括:(1)體液中各類因子定性及定量檢測(cè)由于此類檢測(cè)對(duì)象多為蛋白及各類小分子物質(zhì),因此在取樣過(guò)程中應(yīng)注意防止此類物質(zhì)降解,在獲取后,應(yīng)及時(shí)置于溫(≤-80℃)進(jìn)行保存,在后續(xù)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,也應(yīng)當(dāng)注意保存條件的穩(wěn)定性,避免反復(fù)凍融。常用的方法便是酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA),除此之外,可利用生化分析儀及不同檢測(cè)方法的試劑盒(比色法、比濁法等)方...
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用,采用該構(gòu)建方法可以得到視網(wǎng)膜色素變性疾病模型,該模型可表現(xiàn)出視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征,該模型可用于視網(wǎng)膜色素變性性疾病的研究,可以幫助闡明rp的發(fā)病過(guò)程及機(jī)制,并為該疾病的或預(yù)防提供新的靶標(biāo)。本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的:方面,本發(fā)明實(shí)施例提供了一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法,其包括:敲除目標(biāo)動(dòng)物視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中的基因組中的gm20541基因。znf124是一種編碼鋅指蛋白的新基因。鋅指蛋白是一類具有手指狀結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)錄因子,對(duì)基因調(diào)控起重要的作用。znf124蛋白可穿過(guò)核孔...
建立疾病模型的目的是為了防治人類疾病。因此,疾病模型研究結(jié)果的可靠程度取決于模型與人類疾病的相似或可比擬的程度。接下來(lái)就讓上海研錄帶您了解相關(guān)知識(shí)。一個(gè)好的疾病模型應(yīng)具有以下特點(diǎn):①能夠再現(xiàn)所要研究的人類疾病,動(dòng)物疾病表現(xiàn)應(yīng)該與人類疾病相似;②動(dòng)物能重復(fù)產(chǎn)生該疾病,盡可能能在兩種動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制該病;③動(dòng)物背景資料完整,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格,生命周期要滿足實(shí)驗(yàn)需要;④動(dòng)物要價(jià)廉、來(lái)源充足、便于運(yùn)送;⑤盡可能選用小動(dòng)物。生物醫(yī)學(xué)科研專業(yè)設(shè)計(jì)中常要考慮如何建立動(dòng)物模型的問(wèn)題,因?yàn)楹芏嚓U明疾病及療效機(jī)制的實(shí)驗(yàn)不可能或不應(yīng)該在患者身上進(jìn)行。常要依賴于復(fù)制動(dòng)物模型,但一定要進(jìn)行周密設(shè)計(jì),設(shè)計(jì)時(shí)要遵循下列一些...
脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型【方法】1、小鼠稱重,按體重計(jì)算藥物用量。2、脂多糖(LPS)藥物配制,生理鹽水溶解,根據(jù)小鼠體重配制終濃度為10mg/kg,200ul/只腹腔注射使用。3、抓取小鼠,捏緊小鼠頸背部皮膚,小拇指無(wú)名指疊加固定小鼠左下肢充分暴露小鼠腹部。4、小鼠的頭部向下,這樣腹腔中的就會(huì)自然倒向胸部,防止注射器刺入時(shí)損傷腸道。進(jìn)針的動(dòng)作要輕乘,防止刺傷腹部。5、注射器吸取準(zhǔn)備好的藥物,腹腔左下部與身體呈45度角左右斜角進(jìn)針注射LPS,注射完藥物后,輕微旋轉(zhuǎn)針頭退針,防止漏液。6、造模18h后處死小鼠解剖取組織進(jìn)行組織病理學(xué)檢查?!緳z測(cè)】肝組織有無(wú):1、肝水腫;2、肝出血;...
微波爐中融化后制成1%的瓊脂糖膠。取10μlpcr產(chǎn)物于加樣孔中,120v恒壓瓊脂糖電泳15min.用凝膠成像系統(tǒng)成像。圖4中a上方是gm20541條件性敲除鑒定結(jié)果,wt表示野生型對(duì)照,條帶大小為223bp;het表示雜合子,有兩個(gè)條帶223bp和358bp;sixko表示純合子,條帶大小為358bp。圖4中a下方是six3-cre鑒定結(jié)果。six3-cre大小為200bp。根據(jù)圖4中a的結(jié)果,顯示所采用的鑒定方法可對(duì)新生小鼠的基因型進(jìn)行有效鑒定。其中,gm20541基因敲除純合子小鼠即可作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型(后文用sixko或cko表示gm20541基因敲除純合子小鼠;ctr...
可用鋨酸或甲醛蒸汽固定。主要用于血液或細(xì)胞涂片以及某些薄膜組織的固定。(2)固定的目的①保持其原有狀態(tài):使細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、脂肪、糖、酶等成分轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗苄晕镔|(zhì),迅速防止組織、細(xì)胞的死后變化,防止自溶與,防止細(xì)胞過(guò)度收縮或膨脹而失去其原有形態(tài)結(jié)構(gòu),使之盡量保持生前的狀態(tài)和結(jié)構(gòu)。②以便染色后易于鑒別和觀察:不同組織成分對(duì)染料有不同的親和力,以便染色后易于鑒別和觀察。③使組織塊硬化,便于制作薄片(組織塊在脫水、包埋、切片、染色等過(guò)程中不易損壞)。(3)固定液固定液種類:一類是單純固定液,即只有一種試劑;另一類是混合固定液,由兩種或兩種以上試劑組成。作為較好的固定液,應(yīng)有下列特性,首先,有強(qiáng)滲透...
所述高原光照環(huán)境模擬裝置15包括可見(jiàn)暖光系統(tǒng)和照明亮度無(wú)極控制系統(tǒng),所述可見(jiàn)暖光系統(tǒng)設(shè)置飼養(yǎng)倉(cāng)2頂部。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)集成了可見(jiàn)暖光系統(tǒng)(可模擬高原紅外線和紫外線)與照明亮度無(wú)極控制系統(tǒng),需要燈光時(shí),可通過(guò)燈光系統(tǒng)開(kāi)啟紫外燈以及照明燈,并可根據(jù)所需實(shí)現(xiàn)亮度調(diào)節(jié),通過(guò)日光燈加紫外線燈來(lái)實(shí)現(xiàn)高原高紫外線光照環(huán)境。實(shí)施例5在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述高原溫度環(huán)境模擬裝置16包括降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)和溫度采集顯示系統(tǒng)。本實(shí)施例的工作原理:本系統(tǒng)配置降溫系統(tǒng)、升溫系統(tǒng)、溫控系統(tǒng)與溫度采集顯示系統(tǒng)使系統(tǒng)內(nèi)溫度可無(wú)極調(diào)控,以保障海拔(3000...
然后5%的nds。含有%triton)封閉通透2h,孵育一抗,4℃過(guò)夜。第二天,pbs清洗三次后,孵育相應(yīng)的熒光二抗,然后再用pbs清洗三次,封片,觀察。結(jié)果見(jiàn)圖8,在小鼠4月齡時(shí),通過(guò)視網(wǎng)膜冰凍組織切片染色外節(jié)抗體rhodopsin以及內(nèi)節(jié)抗體nak-atpase后發(fā)現(xiàn),相較于野生型小鼠,gm20541基因敲除純合子小鼠(圖中sixko)視網(wǎng)膜外節(jié)明顯縮短,表現(xiàn)出了明顯退化表征。綜上,可以看出,本發(fā)明實(shí)施例以小鼠為例,通過(guò)cre-loxp基因敲除技術(shù),在小鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞中特異性敲除gm20541基因,小鼠表現(xiàn)出了視力受損,視細(xì)胞外節(jié)變短退化以及視細(xì)胞丟失等視網(wǎng)膜色素變性疾病典型表征...
通過(guò)無(wú)極調(diào)控微負(fù)壓裝置來(lái)調(diào)節(jié)飼養(yǎng)倉(cāng)2內(nèi)的壓力,通過(guò)高原低氧環(huán)境模擬裝置來(lái)調(diào)整飼養(yǎng)倉(cāng)2內(nèi)氧含量,當(dāng)需要燈光時(shí),通過(guò)高原光照環(huán)境模擬裝置15開(kāi)啟紫外燈以及照明燈,通過(guò)高原溫度環(huán)境模擬裝置16來(lái)進(jìn)行調(diào)溫,通過(guò)高原濕度環(huán)境模擬裝置17調(diào)節(jié)飼養(yǎng)倉(cāng)2內(nèi)濕度,通過(guò)動(dòng)物行為學(xué)遠(yuǎn)程觀察單元18可以監(jiān)控動(dòng)物的行為,飼養(yǎng)倉(cāng)2內(nèi)若干代謝籠3配備投料斗8、飲水瓶9可以進(jìn)行攝食量、飲水量測(cè)定,聚糞斗10、尿液排出口11、糞便排出口12便于模型動(dòng)物的尿液和糞便常規(guī)檢測(cè),并且本系統(tǒng)設(shè)置的多個(gè)代謝籠3可以同時(shí)培養(yǎng)多種動(dòng)物,造模動(dòng)物多。實(shí)施例2在實(shí)施例1的基礎(chǔ)上提供的一種高原性人類疾病模型制備環(huán)境模擬系統(tǒng),所述無(wú)極調(diào)控微...
省心省時(shí)一些基因編輯鼠模型表型不易發(fā)現(xiàn),需要結(jié)合外科手術(shù)造模、物理刺激或藥物誘導(dǎo)才能發(fā)現(xiàn)表型。專業(yè)的手術(shù)模型團(tuán)隊(duì)結(jié)合成熟穩(wěn)定的基因修飾鼠平臺(tái)和飼養(yǎng)繁育平臺(tái),賽業(yè)生物可為您提供一站式“基因編輯鼠模型制備——種群擴(kuò)繁——手術(shù)造?!硇万?yàn)證”服務(wù),讓您省心省時(shí)。3.專業(yè)的技術(shù)支持賽業(yè)生物專業(yè)的小動(dòng)物外科手術(shù)團(tuán)隊(duì)熟練掌握多種模型的制備,具備建立復(fù)雜及復(fù)合手術(shù)疾病模型的能力,可能夠根據(jù)您的需求,制定合理的實(shí)驗(yàn)計(jì)劃,同時(shí)提供及時(shí)的項(xiàng)目匯報(bào)與售后服務(wù),讓您省事省心。,確保動(dòng)物福利與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際接軌賽業(yè)模式動(dòng)物中心通過(guò)ISO9001:2015和AAALAC雙認(rèn)證,ISO9001:2015認(rèn)證確保向...
3)基因/蛋白質(zhì)表達(dá)定性或定量檢測(cè)在進(jìn)行分子檢測(cè)的過(guò)程中,保持核酸和蛋白質(zhì)的完整性至關(guān)重要,因此在取樣過(guò)程中,應(yīng)盡量避免核酸及蛋白質(zhì)的降解。如不注意采樣過(guò)程,將會(huì)導(dǎo)致樣本中的核酸及蛋白質(zhì)的無(wú)差別降解,嚴(yán)重影響后續(xù)分子檢測(cè)結(jié)果。在條件允許的情況下,組織樣本在離體后應(yīng)立刻裝入凍存管內(nèi),并立即放入液氮中進(jìn)行冷凍。在RNA提取樣本的保存過(guò)程中,可以選擇非冷凍型RNA保存液或Trizol試劑進(jìn)行RNA酶的抑制。針對(duì)蛋白質(zhì)提取樣本的保存,我們同樣可以使用商品化的蛋白酶抑制劑進(jìn)行短期處理。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PolymeraseChainReaction,PCR)及免疫印跡(Westernblottin...
省心省時(shí)一些基因編輯鼠模型表型不易發(fā)現(xiàn),需要結(jié)合外科手術(shù)造模、物理刺激或藥物誘導(dǎo)才能發(fā)現(xiàn)表型。專業(yè)的手術(shù)模型團(tuán)隊(duì)結(jié)合成熟穩(wěn)定的基因修飾鼠平臺(tái)和飼養(yǎng)繁育平臺(tái),賽業(yè)生物可為您提供一站式“基因編輯鼠模型制備——種群擴(kuò)繁——手術(shù)造模——表型驗(yàn)證”服務(wù),讓您省心省時(shí)。3.專業(yè)的技術(shù)支持賽業(yè)生物專業(yè)的小動(dòng)物外科手術(shù)團(tuán)隊(duì)熟練掌握多種模型的制備,具備建立復(fù)雜及復(fù)合手術(shù)疾病模型的能力,可能夠根據(jù)您的需求,制定合理的實(shí)驗(yàn)計(jì)劃,同時(shí)提供及時(shí)的項(xiàng)目匯報(bào)與售后服務(wù),讓您省事省心。,確保動(dòng)物福利與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與國(guó)際接軌賽業(yè)模式動(dòng)物中心通過(guò)ISO9001:2015和AAALAC雙認(rèn)證,ISO9001:2015認(rèn)證確保向...
本發(fā)明實(shí)施例提供了由上述的方法所得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型在視網(wǎng)膜色素變性性疾病研究中的應(yīng)用。進(jìn)一步地,在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中,所述研究是以非疾病的為目的。通過(guò)本發(fā)明的構(gòu)建方法得到的動(dòng)物模型其具有典型視網(wǎng)膜色素變性性疾病特征,其具有非常廣闊的應(yīng)用前景,例如將其用于研究視網(wǎng)膜色素變性性疾病的發(fā)病過(guò)程、發(fā)病機(jī)制,為深入了解研究視網(wǎng)膜色素變性性疾病提供基礎(chǔ)。又或者將其用于篩選用于預(yù)防或視網(wǎng)膜色素變性性疾病藥物、用于評(píng)價(jià)藥物的療效或預(yù)后等。第三方面,本發(fā)明實(shí)施例提供了由上述的方法所得到的視網(wǎng)膜色素變性疾病模型在篩選用于預(yù)防或視網(wǎng)膜色素變性性疾病藥物中的應(yīng)用。在本發(fā)明方面提供了構(gòu)建方法的基礎(chǔ)...
一種是用beta巰基乙醇打開(kāi)蛋白質(zhì)分子二硫鍵的,另一種是用DTT(二硫蘇糖醇)。兩者的作用是一樣的,但特點(diǎn)不一樣,前者更容易與氧氣反應(yīng),穩(wěn)定性比后者差,如果在常溫下暴露在空中,前者只能維持24小時(shí)的活性,后者卻可以維持7天左右。所以該如何選擇?如果是蛋白樣品較少,跑幾次就可以用完的樣品,這時(shí)選擇beta巰基乙醇。如果樣品很多,計(jì)劃跑上幾十次的,優(yōu)先選擇DTT,建議變性后分裝保存。二、SDS-PAGE凝膠配制1、配膠前準(zhǔn)備首先強(qiáng)調(diào)一下,一塊好的膠是跑好蛋白的前提,所以這個(gè)環(huán)節(jié)也不容忽視。玻璃板的選擇,一種是1毫米厚度的,另一種是,這個(gè)厚度選擇也是有講究的,如果上樣體積小于10微升,優(yōu)先選...
然后再入固定液,但要注意防止組織損傷。要熟悉采集部位。要能準(zhǔn)確的按解剖部位采集,如胰腺,一般取胰島較多的胰腺尾部;肺應(yīng)取有細(xì)支氣管及帶有軟骨片的小支氣管部。如果實(shí)驗(yàn)需進(jìn)行多組織樣本的采集,采集順序應(yīng)按照:消化,神經(jīng)系統(tǒng),皮膚,肌肉等的順序進(jìn)行。選好組織塊的切面。熟悉某些組織成分安排,然后決定其切面的走向;如一長(zhǎng)管狀以橫切面較好。切除不需要的部分。特別是組織周圍的脂肪等,應(yīng)盡可能掉,否則給固定、脫水、浸蠟、切片等帶來(lái)一些不必要的問(wèn)題。組織樣品的固定(1)固定的方法:①小塊組織固定法:從動(dòng)物取下的小塊組織,立即置入液態(tài)固定劑(這是應(yīng)用經(jīng)常的方法)。②注射/灌注固定法:某些組織塊由于體積過(guò)大...