無血清快速細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分,能夠有效提高細胞凍存活率和復蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細胞凍存液,重懸細胞,調節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:胎牛血清取自牛,因此,難以應用到需要避免接觸動物源的應用領域。長沙無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨
無血清快速細胞凍存液凍存細胞復蘇方法:1.從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2.待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3.離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4.清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5.加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6.鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。太原無血清細胞凍存液平均價格存細胞時需現(xiàn)配凍存液(如購買市面上通用的含血清細胞凍存液。
無血清細胞凍存液:細胞凍存及復蘇是細胞培養(yǎng)技術中的重要技術,細胞凍存是細胞長期保存的重要手段。細胞凍存液,作為細胞凍存時必須使用的一種溶液,其作用是將需要凍存的細胞懸浮于凍存液,供給細胞生命代謝所必須的營養(yǎng)物質,同時可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。在現(xiàn)有技術中,一般使用培養(yǎng)基、血清和二甲亞砜(DMSO)按照一定比例混合的方法來凍存細胞,DMSO用量為10%,過低的DMSO濃度會導致凍存效果欠佳,但高濃度的DMSO有較大毒性,會對細胞體造成傷害;且傳統(tǒng)凍存液配方中所使用的血清成本高,增加動物病原污染的可能性。此外,有研究表明長期與胎牛血清接觸的細胞會對溶液介質中的胎牛血清發(fā)生內吞,內吞胎牛血清后的間充質干細胞有可能發(fā)生某些蛋白表達的變化,應用于人體后可發(fā)生異種動物蛋白引起的免疫反應,不能直接用于臨床輸注。因此,利用含有血清的凍存液凍存的細胞會給臨床使用帶來一定的風險。
復蘇方:法1)從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。2)待凍存管中細胞混合液完全融化后,立即加入1ml細胞培養(yǎng)基于該冷凍管中與細胞混合,再將細胞混合液從凍存管中移入含有9ml該細胞培養(yǎng)基的試管中,混合均勻。3)離心收集培養(yǎng)細胞(參考離心條件:1,000~2,000rpm,4℃,3~5min),移去上清液。4)清洗細胞,充分洗凈殘留凍存液。5)加入適量的新鮮細胞培養(yǎng)基,使用移液管緩緩地均勻細胞混合液。適量地稀釋后,將細胞混合液移至事先準備好的培養(yǎng)瓶中。6)鏡檢后,研究者可根據(jù)各自方法和需要來進行細胞培養(yǎng)。同時另一些保護劑不能穿透細胞。
細胞凍存液是如何保護細胞的:當溫度進一步下降,細胞內外都結冰,產(chǎn)生冰晶損傷。但是如果在溶液中加入冷凍保護劑,則可保護細胞免受溶質損傷和冰晶損傷。因為冷凍保護劑容易同溶液中的水分子結合,從而降低冰點,減少冰晶的形成,并且通過其摩爾濃度降低未結冰溶液中電解質的濃度,使細胞免受溶質損傷,細胞得以在較低溫條件下保存。在復蘇時,一般以很快的速度升溫,1-2分鐘內即恢復到常溫,細胞內外不會重新形成較大的冰晶,也不會暴露在高濃度的電解質溶液中過長的時間,從而無冰晶損傷和溶質損傷產(chǎn)生,凍存的細胞經(jīng)復蘇后仍保持其正常的結構和功能。冷凍保護劑對細胞的冷凍保護效果還與冷凍速率、冷凍溫度和復溫速率有關。而且不同的冷凍保護劑其冷凍保護效果也不一樣。凍存液中使用的所有原料均應符合臨床或藥物需求。天津無血清細胞凍存液直銷價
凍存細胞可直接存放于-80℃冰箱,穩(wěn)定保存數(shù)年。長沙無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨
無血清細胞凍存液:1.逐滴加入5-7mL的預熱的培養(yǎng)基到15mL的離心管中,加入的同時輕輕混勻。2.室溫(15-25°C)以300xg離心5分鐘。3.吸出培養(yǎng)基,使細胞沉淀完好無損。使用2mL血清移液管輕輕將細胞沉淀重懸于1mL的培養(yǎng)基中。小心保持細胞作為聚集體。4.將0.5mL的細胞混合物轉移到含有培養(yǎng)基的預包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,每個冷凍管可以鋪板兩個孔)。注意:鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細胞聚集體數(shù)量進行調整。通常在復蘇后,要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱??焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細胞聚集體分布均勻。24小時內不要移動培養(yǎng)板。長沙無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨