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調(diào)pH:雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)成分,能使培養(yǎng)基的pH盡可能的保持在要求的范圍內(nèi),但是配出的培養(yǎng)基若不符合要求,就要進行必要的調(diào)整。如果有已校準(zhǔn)pH計,可用pH計。如果沒有,可用精密的pH試紙,再根據(jù)需要用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸(微調(diào)可用0.1mol/L氫氧化鈉或0.1mol/L鹽酸)調(diào)制所需的pH。培養(yǎng)基的pH一般為7.4~7.6,也有酸性或堿性的。用氫氧化鈉調(diào)整的需要高壓滅菌的培養(yǎng)基,在調(diào)整pH時要調(diào)至高出所需0.1個~0.2個單位,因用氫氧化鈉提哦啊正時,高壓滅菌后,培養(yǎng)基大的pH要降低0.1~0.2。如培養(yǎng)基中含有碳酸鈣成分,可不調(diào)pH。滅菌失效需驗證溫度均勻性和保持時間。中國臺灣瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
MS培養(yǎng)基的特點:MS培養(yǎng)基普遍被使用,它的無機鹽濃度較高,十分有利于組織生長所需的礦質(zhì)營養(yǎng)和加速愈傷組織的生長。因為配方中的離子濃度高,在配制、貯存、消毒等過程中,即使有些成分略有出入,也不會對離子間的平衡造成比較大的影響。MS固體培養(yǎng)基可以用來對愈傷組織可以進行誘導(dǎo),或者用來培養(yǎng)胚、莖段、莖尖及花藥。在進行細胞懸浮培養(yǎng)時,它的液體培養(yǎng)基能夠得到非常明顯的效果。在這種培養(yǎng)基中,有比較適當(dāng)比例和數(shù)量的無機養(yǎng)分,能夠滿足植物細胞在營養(yǎng)上和生理上的需要。所以,通常情形下,氨基酸、酪蛋白水解物、酵母提取物及椰子汁等有機附加成分不需要再被添加。MS培養(yǎng)基中的硝酸鹽、鉀和銨的含量相比于其它培養(yǎng)基的基本成分要更加的高,這亦是其的明顯特征。河南自動培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基制備器負載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生??諝鈮嚎s機是內(nèi)置的!
配制培養(yǎng)基的原則:滅菌處理:為了避免雜菌污染,獲得微生物純培養(yǎng)物,培養(yǎng)基必須及時嚴格滅菌。通常采用高壓蒸汽滅菌。一般培養(yǎng)基用0.IMPa(121℃)維持15~30min即可徹底滅菌。長時間的高溫滅菌會使某些不耐熱的物質(zhì)破壞,如使糖類物質(zhì)形成氨基糖、焦糖。因此,含糖培養(yǎng)基常用0.05MPa(110℃)滅菌20~30min某些對糖類要求更高的培養(yǎng)基,可先將糖過濾除菌或間歇滅菌,再與其他已滅菌的成分混合。長時間高溫滅菌也會使磷酸鹽、碳酸鹽與鈣、鎂鐵等陽離子形成難溶性化合物而產(chǎn)生沉淀。為了防止這類沉淀發(fā)生,可將這些物質(zhì)分別滅菌,冷卻后再混合;也可在培養(yǎng)基中加入少量整合劑(0.01%乙二胺四乙酸,即EDTA)使金屬離子形成可溶性絡(luò)合物,防止沉淀的產(chǎn)生。高壓蒸汽滅菌一般使培養(yǎng)基pH降低,應(yīng)在配制培養(yǎng)基時加以調(diào)節(jié)。
背景技術(shù):培養(yǎng)基是供微生物、植物、動物組織和細菌生長和維持生長用的人工配置的養(yǎng)料,完全滅菌后用于單種微生物培養(yǎng)和鑒定,一般都是在無菌狀態(tài)下儲存,定量使用的,屬于一種高新產(chǎn)業(yè)。傳統(tǒng)的制備培養(yǎng)基的過程先將培養(yǎng)基粉末進行人工配置,攪勻,然后再裝到錐形瓶里邊在蒸汽滅菌器里邊滅菌再使用,這需要耗費大量的人力物力,而且效率不高。目前,國外進口的培養(yǎng)基制備器,可以將配置、滅菌合二為一,較后恒溫保持等待分裝。極大地提高了效率,而且節(jié)省了人力物力,但是國外的的進口設(shè)備價格比較昂貴,因此造成了生產(chǎn)成本的高居不下,在用戶的使用范圍上造成了一定的局限性。目前國內(nèi)沒有公司生產(chǎn)該的培養(yǎng)基制備器,因此,完成培養(yǎng)基配置、滅菌一體化顯得尤為重要。培養(yǎng)基制備器使用注射器將添加劑加入,確保了添加劑的無菌添加!
⑴倒置的小管充滿培養(yǎng)基,不留氣泡。⑵在關(guān)閉殺菌鍋的排氣閥之前,將鍋內(nèi)的氣體排空。⑶試管塞不要塞得太緊。使用硅膠塞時,請勿使用橡膠塞。⑷不可過早打開殺菌鍋,等殺菌鍋內(nèi)的氣壓和溫度降到與室溫相同或相差不大時再打開殺菌鍋。如果按照以上方法操作還有氣泡,可以用水作為培養(yǎng)基組的對照試驗。如果培養(yǎng)基組有氣泡,對照組沒有氣泡,可以確定培養(yǎng)基本身原因。為有效體現(xiàn)培養(yǎng)基其生物學(xué)特性,其制備生長及繁殖需要特定的PH范圍。培養(yǎng)基制備器負載的壓力,有效地避免了培養(yǎng)基過溫失效和培養(yǎng)基中氣泡的產(chǎn)生!吉林培養(yǎng)基消毒 培養(yǎng)基制備器
液體溢出報警需檢查容器裝載量是否超標(biāo)。中國臺灣瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器
液體培養(yǎng)基:為確定液體培養(yǎng)基的生長率,應(yīng)接種適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)物。下面介紹的是用定量、半定量和定性方法評估生長率和選擇性的方法。所推薦的這些方法都是通過將液體培養(yǎng)基以傾注或劃線方式接種到瓊脂平板上培養(yǎng)后,計數(shù)或計算液體培養(yǎng)基分數(shù)而得出其生長數(shù)量的。對于液體培養(yǎng)基定性測試方法,則通過肉眼觀察來實現(xiàn)。目標(biāo)菌和非目標(biāo)菌的定量稀釋法步驟如下:選擇液體培養(yǎng)基10mL/管待檢。接種目標(biāo)菌:將少量測試菌株培養(yǎng)物(每管10CFU~100CFU)接種測試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯,混勻。接種非目標(biāo)菌:將大量測試菌株培養(yǎng)物(每管大于1000CFU)接種測試肉湯和標(biāo)準(zhǔn)肉湯,混勻。中國臺灣瓊脂培養(yǎng)基 培養(yǎng)基制備器