ELISA試劑盒的基本原理:ELISA即酶聯(lián)免疫吸附測定,ELISA試劑盒是基于這一原理開發(fā)的檢測工具。其原理是抗原與抗體的特異性結(jié)合:在試劑盒中,固相載體(通常為96微孔板)預先包被有特異性抗體或抗原,當包含有目標抗原或抗體的樣本加入后,會與預包被的物質(zhì)發(fā)生特異性結(jié)合;然后加入酶標記的二抗或抗原,再次特異性結(jié)合形成復合物;加入底物,酶催化底物發(fā)生顯色反應,通過檢測吸光度值來確定祥本中目標物質(zhì)的含量。這種原理使得ELISA試劑盒具有高度特異性和敏感性,能在復雜的生物樣本如血清、血漿、組織勻漿等中準確檢測微量的目標分子避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。北京專業(yè)ELISA試劑盒信息推薦
將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗體,這些抗體就會與HEV的多肽抗原結(jié)合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會與***次孵育結(jié)合上的HEVIgM抗體相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發(fā)生酶-底物反應,只有那些含有HEVIgM抗體和酶結(jié)合物所形成的復合物的孔才會發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應,并在波長:450nm處測量O.D.值,按照本HEVIgM抗體elisa試劑盒的測試標準,O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽性。重慶綜合ELISA試劑盒廠家價格進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理進口的產(chǎn)品。
底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)24.3ml加蒸餾水50ml。(6)TMB(四甲基聯(lián)苯胺)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)10ml0.75%H2O232μl(7)ABTS使用液:ABTS0.5mg底物緩沖液(PH5.5)1ml3%H2O22μl(8)抗原、抗體和酶標記抗體。(9)正常人血清和陽性對照血清。器材(1)聚苯乙烯塑料板(簡稱酶標板)40孔或96孔,ELISA檢測儀,50μl及100μl加樣器,塑料滴頭,小毛巾,洗滌瓶。(2)小燒杯、玻璃棒、試管、吸管和量筒等。(3)4℃冰箱,37℃孵育箱。
在自身免疫性疾病的診斷中,ELISA試劑盒同樣具有重要意義。例如類風濕關(guān)節(jié)炎,患者體內(nèi)會產(chǎn)生針對自身關(guān)節(jié)組織的抗體,如類風濕因子(RF)。ELISA試劑盒可用于檢測血清中的RF水平。微孔板上固定有抗RF抗體,患者樣本中的RF與之結(jié)合,再通過后續(xù)的酶標記和底物反應步驟進行檢測。系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)也是一種常見的自身免疫性疾病,可通過ELISA試劑盒檢測抗核抗體(ANA)等相關(guān)自身抗體。這些檢測有助于醫(yī)生準確診斷自身免疫性疾病,評估疾病的活動程度,為制定個性化的治療方案提供依據(jù)。進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理,科研人員的福音。
在藥物研發(fā)過程中,ELISA試劑盒在藥物篩選方面具有重要價值。藥物篩選的目的是尋找能夠與特定靶點相互作用的化合物。ELISA試劑盒可以用于檢測化合物與靶點的結(jié)合能力。例如,在研發(fā)***藥物時,目標靶點可能是*細胞表面的受體或細胞內(nèi)的信號分子。ELISA試劑盒可以將靶點固定在微孔板上,然后加入待篩選的化合物,通過檢測結(jié)合后的信號變化來判斷化合物是否與靶點結(jié)合。這種方法可以快速篩選出大量可能有效的化合物,提高藥物研發(fā)的效率。進口ELISA試劑盒,上海伊麗薩生物科技代理的產(chǎn)品很好。有什么ELISA試劑盒電話多少
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操作方法:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6.結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。北京專業(yè)ELISA試劑盒信息推薦